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凍干外泌體誘導膠原化和抗衰老及凍干要點要點

發(fā)布時間:2025-11-23   點擊次數(shù):112次

凍干外泌體誘導膠原化和抗衰老:皮膚紫外線損傷是皮膚老化過程中紫外線損傷的累積,是內(nèi)源性衰老與紫外線輻射相互作用的結(jié)果,具有組織解體、碎裂和膠原束分散等特征。基質(zhì)金屬蛋白酶 (MMP) 可特異性降解幾乎所有細胞外基質(zhì) (ECM) 成分,并在皮膚光老化中發(fā)揮重要作用。光老化會逐漸損害人真皮成纖維細胞 (HDF) 的功能,后者會在真皮中產(chǎn)生膠原蛋白和基質(zhì)金屬蛋白酶。誘導多能干細胞來源的外泌體(iPSCs-Exo 可以增加光老化 HDFs I 型膠原蛋白的表達水平,降低 SA-β-GalMMP-1/3 的表達水平,恢復衰老 HDFs I 型膠原蛋白的表達。外泌體通過冷凍干燥技術(shù),在低溫低壓下移除水分,從液態(tài)轉(zhuǎn)變?yōu)楣虘B(tài)粉末,在長期儲存中保持其生物活性和結(jié)構(gòu)完整性。

外泌體凍干時的關(guān)鍵要點:1. 要制備高純度、高濃度的外泌體溶液;2.選擇凍干保護劑時通常使用1%-5% (w/v) 的海藻糖溶解在PBS或無酶水中。優(yōu)化配方需要通過實驗確定3.  預凍終點溫度必須低于樣品的共晶點或玻璃化轉(zhuǎn)變溫度,確保凍結(jié)。通常需要維持在-40°C以下數(shù)小時。4.外泌體品溫度與擱板溫度接近,且冷凝器捕獲的水分不再顯著增加時,表明一次干燥基本完成;5.外泌體的凍干后的制品的殘留水分是關(guān)鍵指標,一般需要控制在1%-3%之間。水分過高會影響穩(wěn)定性,過低可能導致過度干燥而失活;6. 密封后的凍干粉應在-20°C-80°C的干燥、避光環(huán)境中長期保存。

具有成熟的外泌體凍干工藝技術(shù),可提供上下游的外泌體凍干技術(shù),包括提供外泌體凍干保護劑篩選,凍干工藝優(yōu)化,凍干放大生產(chǎn)。


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